草菇基因枪法遗传转化体系的建立

编号 zgly0001297286

文献类型 期刊论文

文献题名 草菇基因枪法遗传转化体系的建立

作者 郭丽琼  杨飞芸  熊盛  林俊芳 

作者单位 华南农业大学食品学院生物工程系  中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室  华南农业大学食品学院生物工程系 广州510640  海口571101  广州510640  广州510640  海口571101 

母体文献 园艺学报 

年卷期 2005年05期

年份 2005 

分类号 S646.13 

关键词 草菇  基因枪  遗传转化  gus基因 

文摘内容 草菇菌株V1308对潮霉素、卡那霉素、遗传霉素、膦丝菌素的抗性测验结果表明,该菌株对潮霉素敏感,而对其它三者不敏感。进一步测定结果显示,潮霉素的最低筛选浓度在PDSA固体培养基上为75μg·mL-1,在PDSB液体培养基中为50μg·mL-1。以含有35S启动子、gus报告基因、潮霉素抗性基因的质粒pCAMBIA1301为表达载体,采用基因枪法对草菇菌丝体进行遗传转化。结果表明,基因枪的最佳轰击参数为:氦气压力1100Psi,真空压力87·88kPa,靶距离6cm,轰击次数1次。Southern杂交结果显示,gus基因已整合进V1308基因组中。GUS组织化学检测结果证明,gus基因在V1308菌丝体中获得了表达。草菇出菇试验结果显示,转基因草菇和对照都能正常形成子实体,子实体组织分离长出的菌丝体经GUS组织化学检测,证明了外源基因gus能够在转基因草菇的菌丝体中稳定表达。