pEGFP-hTERT真核表达载体的构建及转染牛乳腺细胞方法的优化

编号 zgly0001362263

文献类型 期刊论文

文献题名 pEGFP-hTERT真核表达载体的构建及转染牛乳腺细胞方法的优化

作者 闫晶  贺小英  潘春留  兰志刚  张涌 

作者单位 西北农林科技大学动物医学院生物工程研究所 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2009年05期

年份 2009 

分类号 Q78 

关键词 牛乳腺上皮细胞  胶原酶  表达载体  转染 

文摘内容 针对牛乳腺细胞体外培养存活周期短、转染效率低等特点,分别采用Ⅰ型、Ⅱ型胶原酶消化培养法及组织贴壁培养法,比较了牛乳腺细胞的生长、迁移、分化和凋亡等一系列特征。同时构建了携带绿色荧光蛋白报告基因的端粒酶融合表达载体pEGFP-hTERT,采用脂质体分别转染两种真核表达载体pEGFP-hTERT、pEGFP-C1,通过比较载体不同浓度、传代细胞转染适合密度及生长活力、转染后的荧光强度等检测转染效率。结果表明,第3代细胞接种密度大约70%,浓度为350 ng/μL的载体适合于牛乳腺细胞的转染,转染效率大约为25%。试验结果为牛乳腺细胞体外转基因研究奠定了技术基础。