编号 zgly0000653503
文献类型 期刊论文
文献题名 杂交鹅掌楸体胚发生中胚性细胞总RNA提取
学科分类 220.1510;林木育种学
作者单位 林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室
母体文献 分子植物育种
年卷期 2010,8(2)
页码 393-398
年份 2010
分类号 S662.5
关键词 杂交鹅掌楸 体细胞胚胎发生 RNA提取 反转录 RT-PCR检测
文摘内容 本实验通过比较改良SDS法、Trizol法和设计的改良CTAB法对杂交鹅掌楸体胚发生过程总RNA的提取结果,杂交鹅掌楸体胚发生过程总RNA提取最佳体系为: 最佳试材的用量为0.25~0.5g,氯仿: 异戊醇(24: 1)抽提3次,终浓度2mol/L的LiCl与2倍体积的无水乙醇依次沉淀RNA。该体系提取的总RNA质量高,无降解,无污染。反转录后合成的cDNA第一链分子量大小分布在100~1500bp之间,可以满足下一步实验要求。并以此第一链成功进行了RT-PCR。