利用多肽抗原建立同时检测CSFV和PRRSV抗体的胶体金免疫层析方法

编号 zgly0001469695

文献类型 期刊论文

文献题名 利用多肽抗原建立同时检测CSFV和PRRSV抗体的胶体金免疫层析方法

作者 陈善真  林礼锟  王志花  刘博奇  李中圣  杨洁  王贵平  李其昌 

作者单位 广东海大畜牧兽医研究院 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2014年11期

年份 2014 

分类号 S854.4 

关键词 猪瘟病毒  猪繁殖与呼吸综合征病毒  偶联多肽  胶体金  抗体 

文摘内容 利用合成多肽作为抗原,建立一种同时检测猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体的胶体金免疫层析方法。用人工筛选合成的CSFV多肽和PRRSV多肽葡聚糖偶联物作为包被抗原,以多肽-Biotin-链霉亲和素作为胶体金标记物,羊抗猪IgG包被硝酸纤维膜作为质控带,建立了同时检测CSFV和PRRSV抗体的胶体金免疫层析方法(GICA)。结果表明,多肽与葡聚糖和生物素的偶联效率较高,分别为84.65%和91.37%;链霉亲和素与胶体金结合最佳pH和最佳标记量分别为8.2μg/mL和30μg/mL。试纸卡灵敏度试验表明,血清1∶80稀释仍可检出,与Idexx ELISA试剂盒检出结果基本一致,特异性良好,不与伪狂犬病病毒、口蹄疫病毒、猪圆环病毒和细小病毒的阳性血清发生交叉反应。与Idexx ELISA试剂盒平行检测结果表明,CSFV抗体总体符合率为86.36%;PRRSV抗体总体符合率为83.33%。说明利用偶联多肽制备的试纸卡灵敏度高,特异性好,能够同时检测两种病毒抗体,适于基层养殖场使用。