海南龙血树DNA提取与ISSR反应体系的优化

编号 zgly0000685497

文献类型 期刊论文

文献题名 海南龙血树DNA提取与ISSR反应体系的优化

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 董美超  莫饶  尹俊梅  唐燕琼 

作者单位 海南大学农学院  中国热带农业科学研究院热带作物品种资源研究所 

母体文献 生物技术 

年卷期 2010,20(5)

页码 37-40

年份 2010 

分类号 S722.14 

关键词 海南龙血树  DNA提取  ISSR-PCR反应体系  优化 

文摘内容 目的: 从海南龙血树叶片中提取出高质量的总DNA,建立与优化海南龙血树ISSR的反应体系。方法: 采用4种DNA提取方法,提取海南龙血树叶片中的总DNA,并对DNA进行紫外和电泳检测。采用改良CTAB法提取了基因组DNA模板,对海南龙血树ISSR-PCR反应体系中各个主要影响因子进行了优化和筛选。结果: 改良CTAB法提取的DNAA260/A280在1.7～1.9之间,纯度高、杂质少、DNA完整性好。根据PCR产物的琼脂糖凝胶检测结果,由试验得到的最佳反应体系为: 60ng模板DNA,1.5mmol/LMg2+,0.25mmol/LdNTPs,1.0μmol/L引物,1UTaq酶,总体积为20μl。结论: 改良CTAB法可以从海南龙血树叶片中提取高质量DNA,该反应体系适用于应用ISSR标记开展海南龙血树DNA指纹、遗传多样性等研究。