利用酿酒酵母表达氯化钠胁迫下旱柳全长cDNA文库

编号 zgly0000625926

文献类型 期刊论文

文献题名 利用酿酒酵母表达氯化钠胁迫下旱柳全长cDNA文库

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 杨晔  蒋晶  乔桂荣  周婧  陈银  何正权  李海营  卓仁英 

作者单位 三峡大学生物技术研究中心／天然产物研究与利用湖北省重点实验室  中国林业科学研究院亚热带林业研究所 

母体文献 浙江林学院学报 

年卷期 2009,26(4)

页码 473-478

年份 2009 

分类号 S718.43  Q789 

关键词 植物学  旱柳  cDNA文库  耐盐性  酵母  抗旱相关基因 

文摘内容 为了研究旱柳Sdix matsudana高耐盐无性系I-32的耐盐机制，分离其耐盐相关基因，实验以筛选出的高耐盐旱柳无性系I-32为材料，盐胁迫后提取总核糖核酸（RNA），纯化mRNA，利用改良SMART（switching mechanism at 5’end of RNA transcript）技术合成了全长cDNA，回收500bp以上cDNA大片段克隆到大肠杆菌Escherichia coli和酵母穿梭载体pYES2．1中，建成旱柳全长cDNA文库，对随机挑取的阳性克隆进行聚合酶链式反应（PCR）鉴定，插入片断平均值为1000bp左右．说明所构建的文库达到了用于目的基因分离筛选和表达的建库要求。通过尿嘧啶缺陷型培养基添加80-130g．L^-1氯化钠筛选文库．与野生型酵母菌株相比，转化子的耐盐能力提高。研究结果为克隆与旱柳抗旱相关基因奠定了基础。图6参17