编号 zgly0001205089
文献类型 期刊论文
文献题名 产harpin的成团泛菌工程菌的构建
作者 赵立平 申泉 李艳琴 宁红秀 张晋丹 董汉松 徐文联 段明星
作者单位 山西大学生物工程实验室!太原030006 山东农业大学植保系!泰安271018刘爱新 山东农业大学植保系!泰安271018 清华大学生命科学与?
母体文献 植物病理学报
年卷期 1999年02期
年份 1999
分类号 S432
关键词 成团泛菌(Pantoeaagglomerans) harpin 工程菌
文摘内容 梨火疫病菌( Erwinia amylovora) 产生的胞外蛋白harpin 是引发其非寄主植物过敏反应的因子。harpin 蛋白还具有诱导植物抗性的功能。成团泛菌( Pantoea agglomerans)308R 对链格胞属( Alternaria) 的真菌具有拮抗活性,是一株抗利福霉素的自发突变株,对壮观霉素敏感。本文通过电击转化法将带有梨火疫病菌hrp 基因簇的重组质粒pCPP430 导入308R。所得转化子具有pCPP430 的壮观霉素抗药性标记,在番茄上引起过敏反应;从转化子中提取到与pCPP430 大小一样的质粒,其酶切物理图谱也与pCPP430 完全相同;用地高辛标记的harpin 的结构基因hrpN 为探针对转化子中的质粒进行Southern blot ting 分析,结果在转化子中得到信号明显的杂交片段,而受体菌308R 中未出现杂交信号;提取细菌的外壁的蛋白质进行PAGE 分析,在大约44 kd 的位置上308R(pCPP430) 比308R 明显多出1 条带。这些结果表明成团泛菌能够表达梨火疫病菌的hrp 基因簇,所产harpin 蛋白也是有活性的