新生犊牛睾丸支持细胞的高效分离培养与鉴定

编号 zgly0001376263

文献类型 期刊论文

文献题名 新生犊牛睾丸支持细胞的高效分离培养与鉴定

作者 刘闯  赵晓娥  马保华  孙冰洁 

作者单位 西北农林科技大学动物医学院农业部动物生殖生理和胚胎工程重点开放实验室 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2010年01期

年份 2010 

分类号 S823  Q813 

关键词 睾丸支持细胞  高效分离方法  新生犊牛 

文摘内容 【目的】采用改良方法对犊牛睾丸支持细胞进行体外快速分离培养,以期建立一种简单快捷的支持细胞原代培养方法。【方法】采用1.0 g/L的Ⅳ型胶原酶和2.5 g/L的胰蛋白酶,对经分离曲细精管和组织剪碎2种方法处理的睾丸组织进行次第消化,比较2种方法对睾丸支持细胞分离效果的影响;采用福尔根染色法和免疫细胞化学方法鉴定睾丸支持细胞。【结果】睾丸组织采用分离曲细精管后进行酶消化的时间(8 min)较组织剪碎法(15min)短,并且前者消化所得有效细胞数(1.0×107)高于后者(0.81×107),两者具有显著差异(P<0.05);福尔根染色和免疫细胞化学染色结果显示,分离细胞有卫星核小体存在,且细胞中ABP阳性表达,表明分离培养的细胞确为睾丸支持细胞。【结论】睾丸组织经曲细精管分离后进行胶原酶和胰蛋白酶次第消化,有助于快速高效分离睾丸支持细胞。