BcMF3反义基因植物表达载体的构建及其对拟南芥的遗传转化

编号 zgly0000387787

文献类型 期刊论文

文献题名 BcMF3反义基因植物表达载体的构建及其对拟南芥的遗传转化

作者 刘乐承  余小林  叶纨芝  向珣  卢钢  曹家树 

作者单位 浙江大学蔬菜研究所  长江大学园艺园林学院 

母体文献 长江大学学报: 自然科学版 

年卷期 2005,2(11)

页码 76-79

年份 2005 

分类号 Q785 

关键词 反义基因  拟南芥(Arabidopsis  thaliana)  BcMF3  白菜  表达载体  遗传转化 

文摘内容 根据编码白菜(Brassica rapa L.ssp.chinensis, syn B.campestris ssp.chinensis)果胶甲酯酶的BcMF3基因cDNA序列内部第1343～1797个碱基之间序列设计引物, 从白菜花蕾eDNA中PCR扩增出455bp的片段, 把该片段作为反义基因连接至双元载体pBI121上, 得到了植物表达栽体pBI-B3, 并用“三亲杂交”法导入农杆菌LBA4404菌株中, PCR扩增和酶切结果表明所构建的植物表达载体pBFB3含有BcMF3反义基因片断, 并已导入了根癌农杆菌(Agrobacterinrn tume fuciens)中; 采用花序浸润法转化拟南芥(Arabidopsis thaliana)后, 播种筛选浸润植株的种子获得了5株卡那霉素抗性植株, PCR扩增证明BcMF3反义片段成功整合到拟南芥基因组中; 转基因拟南芥子代(T2)的抗性分离符合孟德尔分离比例, 表明外源基因是单一位点插入。