对鳞翅目害虫有活性的cry1C基因的克隆和表达

编号 zgly0001265737

文献类型 期刊论文

文献题名 对鳞翅目害虫有活性的cry1C基因的克隆和表达

作者 宋福平  张杰  韩岚岚  高继国 

作者单位 中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室  东北农业大学生命科学院 北京 100094  北京 100094  哈尔滨 150030 

母体文献 植物保护学报 

年卷期 2003年02期

年份 2003 

分类号 S433.4 

关键词 PCR-RFLP  cry1Cb基因  苏云金芽孢杆菌  小菜蛾 

文摘内容 在鉴定苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis,简称Bt）Btc001菌株cry基因型的基础上,构建了Btc001菌株质粒DNA Hind Ⅲ片段的文库,并利用聚合酶链式反应-限制性酶切片段多态性（PCR-RFLP）方法筛选出含有cry1Cb全长基因的13.5kb大片段,酶切分析得到该片段的物理图谱,BamHI和EcoRI酶切完成了6.5kb含全长基因的亚克隆,并对这条6.5kb片段亚克隆、测序,序列在国际核酸序列数据库（GenBank）登记（AY007686）,并由Bt杀虫晶体蛋白基因国际命名委员会命名为cry1Cb2基因。根据序列设计了一对用于扩增全长基因的引物S5B1CB和S3B1CB,扩增产物插入表达载体pET-21b中,诱导后在大肠杆菌BL21（DE3）中获得高效表达。表达产物对小菜蛾（Plutella xylostella）表现出较高活性,LC50达到7.97μg/ml。