黑龙江凉水自然保护区苏云金芽孢杆菌的收集与鉴定

编号 zgly0000641470

文献类型 期刊论文

文献题名 黑龙江凉水自然保护区苏云金芽孢杆菌的收集与鉴定

学科分类 220.30;森林保护学

作者 张文飞  谢柳  赵立仕  方宣钧  柳参奎 

作者单位 海南海德热带农业资源研究所  东北林业大学盐碱地生物资源环境研究中心 

母体文献 基因组学与应用生物学 

年卷期 2009,28(4)

页码 685-690

年份 2009 

分类号 S476.11  S759.9 

关键词 苏云金芽孢杆菌  伴胞晶体蛋白  cry基因型  SDS-PAGE  PCR-RFLP 

文摘内容 黑龙江凉水自然保护区是我国现有保存下来的较大片原始红松林基地之一，总面积6394hm^2，森林覆盖率95％以上。本研究从小兴安岭凉水自然保护区采集土样782份，采用醋酸钠培养基结合高温方法筛选土壤中的芽孢杆菌，通过光学显微镜观察鉴定产生伴胞晶体的苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis．Bt）。总计分离得到芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌分别为1735株和33株，Bt菌株的分离率和出菌率分别为1．90％和4．22％。利用SDS-PAGE和PCR—RFLP方法对筛选获得的成分离株进行了杀虫晶体蛋白和基因型分析，结果表明14株产菱形伴胞的＆菌株，SDS-PAGE电泳分析芽孢后期产生分子量大小130kD蛋白带，PCR-RFLP分析初步鉴定为crylAc基因，其它产圆形或其它不定形晶体蛋白的＆分离菌中，芽孢后期主要蛋白大小为20～150kD不等，PCR—RFLP方法鉴定结合PCR片段测序分析这些菌株含有新型cry4、cry39和cry40基因等。本研究是“中国助资源收鉴与利用”项目组成部分之一，凉水自然保护区苏云金芽孢杆菌的收集与鉴定目的是要对整个东北地区成资源分布和多样性作一个初步评估，实验结果表明东北森林地区具有丰富多样的威菌株和杀虫基因资源。