杉木荧光标记通用引物多重PCR微卫星基因分型技术的建立与应用

编号 zgly0001528974

文献类型 期刊论文

文献题名 杉木荧光标记通用引物多重PCR微卫星基因分型技术的建立与应用

作者 武星彤  文亚峰  韩文军  周宏  徐刚标 

作者单位 中南林业科技大学  广东省韶关市林业局 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2016年07期

年份 2016 

分类号 S791.27 

关键词 杉木  微卫星  基因分型  荧光标记  多重PCR 

文摘内容 荧光标记通用引物基因分型技术以其经济、实用的特点在微卫星标记研究中得到了较多应用。但传统以M13为通用引物的方法存在非特异性扩增条带多、基因分型质量差等问题。为加快微卫星基因分型新技术的推广和应用,提高林木分子遗传学研究水平,本研究参照Blacket等的方法,并结合微卫星多重PCR(multiplex PCR)技术,成功建立了杉木(Cunninghamia lanceolata)荧光标记通用引物多重PCR微卫星基因分型技术体系。新方法的关键在于应用了4个具有较高退火温度的通用引物和QIAGEN誖Multiplex PCR试剂盒,它们能有效减少非特异性扩增条带的产生,多重PCR体系的优化简单、快捷。通常只需调整通用引物的浓度和PCR产物稀释倍数,就能获得清晰、稳定的基因分型结果。研究表明,新方法不仅大幅度降低了实验成本,而且显著提高了微卫星基因分型效率。利用该技术实现了杉木EST-SSR标记位点的规模化开发,并开展了杉木种子园育种材料遗传多样性研究。本研究新技术的建立和应用可为杉木分子遗传学研究提供技术保障,也对其他物种的相关研究具有重要的参考价值。