农杆菌介导的GbWOX9基因对海岛棉胚性细胞的遗传转化

编号 zgly0001639809

文献类型 期刊论文

文献题名 农杆菌介导的GbWOX9基因对海岛棉胚性细胞的遗传转化

作者 芮存  李娟  曲延英  陈全家  汪志星  高文伟  张霞 

作者单位 新疆农业大学农学院农业生物技术重点实验室 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2018年13期

年份 2018 

分类号 S562 

关键词 海岛棉  GbWOX9  农杆菌  潮霉素  胚性细胞 

文摘内容 为探究WOX9基因在棉花体细胞胚胎发育过程中的功能,借助农杆菌介导化学试剂诱导型植物表达载体p TA7002/GbWOX9和pTA7002/GbWOX9 anti对海岛棉‘新海16’胚性细胞进行遗传转化,以此利用化学诱导剂在胚性细胞中诱导GbWOX9的过量或抑制表达。研究结果表明在菌液OD600≈0.5~0.6时进行15 min的农杆菌侵染并共培养24 h之后,将侵染的细胞在500 mg/L头孢和20 mg/L潮霉素的抗性培养基上筛选继代两次,最终获得若干抗性阳性胚性细胞。进一步将抗性阳性细胞在化学诱导剂30μmol/L地塞米松处理5 h后,通过qRT-PCR技术对其进行GbWOX9的基因表达鉴定,结果表明与对照组相比,正、反义转基因抗性阳性细胞中的GbWOX9基因表达量皆有显著差异。该研究初步建立了以潮霉素为筛选标记的海岛棉遗传转化体系,并在此基础上将GbWOX9正义和反义链成功导入‘新海16’胚性细胞中,为其功能的鉴定提供了参考。