PEG介导的柱状田头菇遗传转化体系建立

编号 zgly0001710775

文献类型 期刊论文

文献题名 PEG介导的柱状田头菇遗传转化体系建立

作者 陶南  崔祥华  柴红梅  马渊浩  赵永昌  陈卫民 

作者单位 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所  云南省农业生物技术重点实验室  农业部西南作物基因资源与种质创制重点实验室  西南林业大学生命科学学院 

母体文献 菌物学报 

年卷期 2020年06期

年份 2020 

分类号 S646 

关键词 柱状田头菇  PEG介导转化  潮霉素  绿色荧光蛋白 

文摘内容 柱状田头菇(茶树菇)Agrocybeaegerita是一种美味的食用菌,具有极高的经济价值。随着其全基因组测序的完成,功能基因组学研究也逐渐展开,其中,高效的遗传转化体系作为技术基础成为研究重点。本研究以柱状田头菇原生质体为受体、潮霉素抗性基因(hph)作为筛选标记,以增强型绿色荧光蛋白基因(egfp)为报告基因,应用PEG介导法进行柱状田头菇遗传转化体系研究。结果表明,150μg/m L潮霉素可以完全抑制柱状田头菇的生长。30℃下用2%裂解酶液酶解菌丝3h,能够获得最大得率的原生质体。通过PEG介导将构建好的DNA片段转化入柱状田头菇原生质体,通过潮霉素抗性筛选获得转化子,转化得率达到7个/μg DNA。PCR验证和荧光显微镜观察,外源片段成功转入柱状田头菇中并稳定表达。本研究建立的PEG介导转化体系,为柱状田头菇基因功能研究提供了技术基础。