以支持细胞为饲养层培养小鼠精原干细胞

编号 zgly0000409159

文献类型 期刊论文

文献题名 以支持细胞为饲养层培养小鼠精原干细胞

作者 李恩中  李德雪  张世庆  王常勇  张学明  王海滨  鲁景艳  王静 

作者单位 军事医学科学院基础医学研究所  黄淮学院农林科学系  吉林大学农学部 

母体文献 动物学报 

年卷期 2006,52(4)

页码 774-779

年份 2006 

分类号 Q954.434  S814.6 

关键词 小鼠  精原干细胞  Sertoli细胞  饲养层 

文摘内容 为探索精原干细胞(Spermatogonial stem cells, SSCs)体外自增殖的条件以及SSCs体外快速扩增的方法, 以6—8日龄昆明乳鼠为材料, 分离小鼠睾丸细胞, 采用Percoll梯度离心法富集SSCs; 以经丝裂霉素C处理的Sertoli细胞作饲养层, 以DMEM为基本培养基, 加入5%胎牛血清和10^3u/ml的白血病抑制因子(Leukemia inhibitory factor, LIF), 体外培养SSCs; 运用免疫荧光技术, 以SSCs特异性表面分子Thy-1为标志, 对原代培养20d和传代培养14d的细胞进行鉴定。该培养体系下, SSCs贴壁时间为6h-9h, 48h后可见细胞分裂, 迅速增殖出现在接种12d以后。接种后第20d形成数十至上百个细胞的细胞团, 细胞总数比接种时增加了45—245倍, 100倍显微镜下观察可见, 单位视野内细胞团数为26±4个。传代后细胞增殖较快。原代培养20d和传代培养14d的细胞均为Thy-1阳性; 而传代20d后, 细胞周缘不整, 有伪足出现, 呈现出死亡迹象。该培养条比较适合SSCs短期快速增殖[动物学报52(4): 774—779, 2006]。