抗冻蛋白基因AFP表达载体构建及转化紫花苜蓿初报

编号 zgly0001362014

文献类型 期刊论文

文献题名 抗冻蛋白基因AFP表达载体构建及转化紫花苜蓿初报

作者 郝凤  刘晓静  毛娟  于铁峰  张德罡 

作者单位 甘肃农业大学  草业学院  甘肃农业大学  农学院 

母体文献 草地学报 

年卷期 2009年06期

年份 2009 

分类号 S541.9 

关键词 抗冻蛋白基因AFP  载体构建  遗传转化  紫花苜蓿 

文摘内容 以胡萝卜基因组DNA为模板,用PCR方法扩增目的基因,连接到PGEM-T Easy Vector载体上,经XbalⅠ和SacⅠ双酶切,将目的片段连接到PBI121工程质粒上,通过农杆菌介导法转化和田苜蓿,为提高紫花苜蓿的抗冻性奠定基础。结果表明,成功克隆出抗冻蛋白基因AFP,并构建成AFP植物表达载体。获得了具有卡那霉素抗性的苜蓿愈伤组织,和田苜蓿愈伤组织的最佳Kan筛选浓度为60 mg/L。经PCR技术鉴定,AFP抗冻蛋白基因已整合到苜蓿基因组中。