miRNA-34c实时荧光定量PCR检测方法的建立

编号 zgly0001448820

文献类型 期刊论文

文献题名 miRNA-34c实时荧光定量PCR检测方法的建立

作者 刘笙腩  颜润川  李玲玲  张雅妹  陈树林  赵善廷 

作者单位 西北农林科技大学动物医学院 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2013年11期

年份 2013 

分类号 Q78  S814.8 

关键词 实时荧光定量PCR  miRNA-34c  颈环  退火温度  模板浓度 

文摘内容 为建立稳定有效检测miR-34c的实时荧光定量技术体系,采用茎环结构法设计了反转录引物,并通过梯度浓度及梯度温度PCR法对miR-34c的最佳退火延伸温度和模板浓度进行了确定,最后通过实时荧光定量PCR对miR-34c进行检测。试验成功建立了精确检测miR-34c的实时荧光定量技术体系,其中miR-34c最佳退火延伸温度为62.4℃及每个实时定量反应体系中cDNA对应的RNA量最适浓度为50ng/μL,并得到重复性高、特异性强的检测结果。该技术体系的建立不仅为检测miR-34c提供了精准便捷的方法,而且可为设计检测其他miRNA提供技术支持。