中国红豆杉羟化酶基因TcCYP725A22的克隆与功能研究

编号 zgly0001675729

文献类型 期刊论文

文献题名 中国红豆杉羟化酶基因TcCYP725A22的克隆与功能研究

作者 廖卫芳  赵盛英  付春华  刘志国  缪礼鸿  赵春芳  余龙江 

作者单位 武汉轻工大学生物与制药工程学院  华中科技大学生命科学与技术学院 

母体文献 植物科学学报 

年卷期 2019年03期

年份 2019 

分类号 S791.49 

关键词 紫杉醇  生物合成途径  羟化酶  红豆杉  基因功能分析 

文摘内容 基于中国红豆杉(Taxus wallichiana var. chinensis(Pilger) Florin)转录组序列,从中扩增到1个新的P450羟化酶基因TcCYP725A22,并对其进行了克隆、表达及功能分析。生物信息学分析结果显示:该基因编码区长1500 bp,共编码499个氨基酸;编码蛋白无信号肽,包含1个跨膜区,具有催化活性中心结构域。进一步将该基因在酿酒酵母WAT11中进行异源表达功能研究,蛋白质免疫印迹(Western blot)实验结果表明,目的蛋白TcCYP725A22可在WAT11中成功表达;液相色谱-质谱联用(LC-MS)分析结果显示,羟化酶TcCYP725A22对底物紫杉素表现出催化活性。依据质谱结果及反应底物紫杉素的分子结构,判断其催化产物可能为添加了2个羟基的紫杉烷新衍生物。