三种甘薯病毒多重RT-PCR检测技术的建立

编号 zgly0001544997

文献类型 期刊论文

文献题名 三种甘薯病毒多重RT-PCR检测技术的建立

作者 蒋素华  程喜梅  宋彩霞  许申平  梁芳  崔波 

作者单位 郑州师范学院生物工程研究所  郑州拓洋实业有限公司  河南农业大学生命科学学院 

母体文献 植物保护 

年卷期 2017年01期

年份 2017 

分类号 S435.31 

关键词 甘薯  病毒  多重RT-PCR 

文摘内容 本文根据GenBank中甘薯G病毒(SPVG)、甘薯卷叶病毒(SPLCV)和甘薯羽状斑驳病毒(SPFMV)外壳蛋白(CP)基因序列设计特异引物,对多重RT-PCR退火温度、延伸温度、模板浓度、引物浓度进行改良优化,建立能同时检测3种甘薯病毒的多重RT-PCR方法。该方法能同时扩增出SPVG、SPLCV和SPFMV特异片段,其大小分别是800、276和570bp。测序结果表明,扩增出的3种病毒序列与相应参考序列相似性达到98%以上。灵敏度分析结果表明,多重RT-PCR方法能够检测cDNA的量为0.1ng。应用建立的多重RT-PCR检测方法对田间样品进行检测,结果显示该方法可以特异、快速、灵敏地同时检测3种甘薯病毒。这些研究结果可为甘薯病毒检测提供参考。