碱茅PutSnRK2基因表达、克隆及其蛋白纯化

编号 zgly0001617528

文献类型 期刊论文

文献题名 碱茅PutSnRK2基因表达、克隆及其蛋白纯化

作者 刘伟  张欣欣 

作者单位 东北林业大学盐碱地生物资源环境研究中心 

母体文献 草业科学 

年卷期 2016年10期

年份 2016 

分类号 Q943.2 

关键词 碱茅  SnRK2  非生物胁迫  基因表达  蛋白表达与纯化 

文摘内容 从NaHCO3逆境胁迫下碱茅（Puccinellia tenuiflora）的cDNA文库中克隆得到PutSnRK2基因全长cDNA。PutSnRK2基因序列中存在1 077bp的开放阅读框,编码358个氨基酸,预测蛋白分子量为41.11kDa,等电点为5.63。实时荧光定量PCR分析表明,在NaHCO3、NaCl、ABA和PEG胁迫下,PutSnRK2基因在碱茅叶、根中均受到显著诱导（P<0.05）。同时用pGEX-6p-3载体构建了PutSnRK2基因的原核表达载体,将其转化大肠杆菌BL21（DE3）,经诱导表达纯化得到GST-PutSnRK2融合蛋白,为后续试验分析PutSnRK2蛋白的激酶活性、验证蛋白间的相互作用等研究奠定了基础。