肠出血性大肠埃希菌O157∶H7环介导恒温扩增快速检测方法的建立与应用

编号 zgly0000656926

文献类型 期刊论文

文献题名 肠出血性大肠埃希菌O157∶H7环介导恒温扩增快速检测方法的建立与应用

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 徐义刚  崔丽春  李苏龙  于恒纯  李丹丹  谢晓峰  姜艳春 

作者单位 黑龙江出入境检验检疫局检验检疫技术中心  东北林业大学 

母体文献 中国人兽共患病学报 

年卷期 2010(7)

页码 618-623

年份 2010 

分类号 R378.2 

关键词 肠出血性大肠埃希菌O157∶H7  rfbE基因  环介导恒温扩增  快速检测 

文摘内容 目的肠出血性大肠埃希菌(Enterohemorrhagic Escherichia coli,EHEC)O157∶H7是一种重要的人畜共患病致病菌,主要通过被污染的食物传播,引起出血性结肠炎,建立其快速检测方法具有重要意义。方法基于EHEC O157∶H7保守的rfbE基因序列,设计4条引物,利用环介导等温扩增技术(loop-mediatedisothermal amplification,LAMP),成功建立了EHEC O157∶H7LAMP快速检测方法 ,60min内即可完成致病菌检测。结果利用该LAMP方法对30种共38株细菌进行检测,所试EHEC O157∶H7均为阳性结果 ,说明该方法具有高度特异性。本方法对纯培养的EHEC O157∶H7检测限为12CFU/mL,污染食品中EHEC O157∶H7的检测限为18CFU/g。实践应用表明,对1121份进出口肉类、奶类制品及人工污染样品等进行检测,检出57份LAMP阳性,与采用AOAC标准检测结果的符合率为100%。结论该LAMP方法操作简便、特异性强、灵敏度高,具有良好的实用性。