编号 zgly0001495888
文献类型 期刊论文
文献题名 二硝基氯苯抑制硫氧还蛋白还原酶活性诱导的细胞氧化损伤模型的建立
作者单位 内蒙古农业大学动物科学学院 内蒙古师范大学生命科学与技术学院
母体文献 动物营养学报
年卷期 2015年12期
年份 2015
分类号 S852.3
关键词 奶牛乳腺上皮细胞 二硝基氯苯 氧化损伤模型
文摘内容 本试验旨在利用硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase,TrxR)的抑制剂二硝基氯苯(dinitrochlorobenzene,DNCB)作为刺激源,以细胞增殖率、TrxR活性和抗氧化指标作为判断依据,建立奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells,BMEC)的氧化损伤模型。试验分2部分进行。试验1采用单因子完全随机试验设计,将第3代的BMEC随机分为35组,每组8个重复。培养液中分别添加0(对照)、10、30、50、100、300和500μmol/L的DNCB,使之分别作用细胞2、4、6、8和12 h,通过检测细胞增殖率,初步确定适宜的作用时间;试验2在试验1得出适宜DNCB作用时间的基础上,采用单因子随机试验设计,将BMEC随机分为7组,每组6个重复,培养液中分别添加0(对照)、10、30、50、100、300和500μmol/L的DNCB,通过检测细胞TrxR活性以及抗氧化指标,筛选出适宜的DNCB处理浓度。结果表明,与对照组相比,300μmol/L DNCB作用2 h对BM EC产生了明显的氧化应激,细胞增殖率降到73.31%,TrxR活性降至56.23%,谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性也显著降低(P<0.05),丙二醛含量显著提高(P<0.05)。结果提示,300μmol/L的DNCB作用浓度和2 h的作用时间可作为建立细胞氧化损伤模型的适宜剂量与作用时间。