家蚕抗菌肽Cecropin-XJ的原核优化表达及活性检测

编号 zgly0001422247

文献类型 期刊论文

文献题名 家蚕抗菌肽Cecropin-XJ的原核优化表达及活性检测

作者 夏丽洁  刘忠渊  许岗  张富春 

作者单位 新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源基因工程重点实验室  湖南福来格生物技术有限公司 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2012年05期

年份 2012 

分类号 S881.2 

关键词 家蚕抗菌肽  Cecropin-XJ  原核表达  载体  诱导条件  抑菌活性 

文摘内容 Cecropin-XJ是一种从家蚕幼虫体内分离纯化的具有很强热稳定性、酸碱适应性和广谱抗菌性的新型家蚕抗菌肽。以融合不同标签的表达载体构建pET28a-Cecropin-XJ、pET30a-Cecropin-XJ、pET32a-Cecropin-XJ、pMAL-p2X-Cecropin-XJ重组质粒,转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,并优化诱导时间、诱导温度、诱导剂IPTG浓度等条件,通过对目的蛋白表达的检测分析,选择、建立Cecropin-XJ在大肠杆菌中高效、可溶性表达的技术体系。试验结果表明:采用构建的重组原核表达载体pET32a-Cecropin-XJ在IPTG终浓度为0.8 mmol/L、培养温度为37℃的条件下诱导5 h,目的蛋白的表达量可达10 mg/L,重组蛋白主要以可溶性表达产物形式存在,可溶性蛋白的表达量约占菌体总蛋白的35%,经金属螯合层析进一步纯化后的Cecropin-XJ融合蛋白纯度可达90%以上。体外抑菌试验显示Cecropin-XJ融合蛋白对金黄色葡萄球菌具有较强的抑菌活性。