家蚕核型多角体病毒gp41基因的融合表达及功能鉴定

编号 zgly0001381866

文献类型 期刊论文

文献题名 家蚕核型多角体病毒gp41基因的融合表达及功能鉴定

作者 朱莎  李兵  沈卫德 

作者单位 苏州大学基础医学与生物科学学院  现代丝绸国家工程实验室 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2010年01期

年份 2010 

分类号 S884.51 

关键词 家蚕核型多角体病毒  gp41基因  杆状病毒表达系统  绿色荧光蛋白  融合表达  免疫印迹检测 

文摘内容 为了研究家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedro virus,BmNPV)中GP41蛋白的包装功能,从BmNPV基因组中克隆了gp41基因,并将其克隆到杆状病毒转移载体pFastBac1-gfp中,构建重组转移载体pFastBac1-gp41-gfp,再利用杆状病毒表达系统(Bac-to-Bac)筛选重组杆状病毒,在家蚕BmN细胞系中进行融合表达和定位分析。SDS-PAGE和Western blot检测结果显示,经重组杆状病毒r-gp41-gfp感染的BmN细胞新增一条大小为65 kD左右的蛋白条带,证明该融合蛋白在BmN细胞中成功表达。用激光共聚焦显微镜观察到绿色荧光充满于细胞质中,不能形成聚集体。与野生型BmNPV混合感染的实验也表明荧光出现的位置与多角体无关,说明GP41-GFP蛋白不能附着在多角体表面,融合表达可能影响了GP41蛋白与多角体的结合。