土壤微生物RAPD分析体系的优化研究

编号 zgly0000390846

文献类型 期刊论文

文献题名 土壤微生物RAPD分析体系的优化研究

作者 焦晓丹  吴凤芝  高海军 

作者单位 东北农业大学园艺系  建三江大兴农场 

母体文献 生态学杂志 

年卷期 2005,24(8)

页码 921-924

年份 2005 

分类号 S512 

关键词 土壤微生物  RAPD反应体系  优化 

文摘内容 采用正交实验设计, 对影响土壤微生物RAPD扩增体系的Mg^2+、dNTP浓度及引物浓度进行了研究, 同时对退火温度、延伸时间及循环次数进行摸索。结果表明, 适宜土壤微生物PCR扩增反应在25μl体积中进行, 包括7ng土壤微生物DNA样品、20pm随机引物、1.5uTaq酶、3.0mmol·L^-1。MgCL2和0.2mmol·L^-1dNTP。PCR扩增反应进程如下: 94℃3min, 使土壤DNA变性; 然后再进行39个循环, 每个循环包括94℃1min, 37℃40s, 72℃90s, 结束后72℃延伸7min。