土壤微生物16S rDNA V6-V8区PCR反应条件优化

编号 zgly0000698288

文献类型 期刊论文

文献题名 土壤微生物16S rDNA V6-V8区PCR反应条件优化

学科分类 220.1040;森林土壤学

作者 闫晗  吴祥云  吴杏伟  黄静  何志明 

作者单位 辽宁工程技术大学理学院 

母体文献 应用化工 

年卷期 2010,39(9)

页码 1325-1327

年份 2010 

分类号 S154.3 X171 

关键词 土壤微生物  16S  rDNA  PCR  优化 

文摘内容 为建立最佳的土壤微生物16S rDNA V6-V8区PCR反应体系和条件,直接从土壤中提取微生物总DNA,经纯化后作为脱氧核糖核酸(DNA)模板,研究了退火温度、引物、dNTPs、Taq聚合酶浓度、Mg2+、模板DNA对扩增反应的影响。结果表明,最佳反应体系为: 在20μL反应体系中,正向引物和反向引物的最适浓度均为0.5μmol/L,dNTPs最适浓度0.2 mmol/L,Taq聚合酶量为1 U,Mg2+最适浓度2.0 mmol/L,DNA模板量为10~15 ng。