中华豆芫菁β-actin基因cDNA的克隆、序列分析及表达量检测

编号 zgly0000807325

文献类型 期刊论文

文献题名 中华豆芫菁β-actin基因cDNA的克隆、序列分析及表达量检测

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 霍棠 

作者单位 西北农林科技大学植物保护学院植保资源与病虫害治理教育部重点实验室 

母体文献 西北农林科技大学学报: 自然科学版 

年卷期 2012(11)

页码 97-102

年份 2012 

分类号 Q78 

关键词 中华豆芫菁  β-actin基因  反转录PCR  RACE技术  实时定量PCR 

文摘内容 【目的】:克隆中华豆芫菁(Epicauta chinensis Laporte)β-actin基因全长cDNA序列,并检测其在相对实时定量研究中作为内参基因的可靠性。【方法】:采用RT-PCR和RACE技术扩增中华豆芫菁β-actin基因全长cD-NA序列,利用生物信息学软件对其进行序列分析;并用实时定量PCR方法检测在中华豆芫菁雄性成虫脑、中肠、精巢和脂肪体4种不同组织中及注射刺激和非刺激条件下β-actin基因的表达量。【结果】:中华豆芫菁β-actin基因全长1 673bp,其中5′非编码区88bp,3′非编码区455bp,开放阅读框为1 120bp,编码376个氨基酸,推测其编码蛋白分子质量约为93.6ku,理论等电点为5.09,富含6类特定功能位点,其氨基酸序列与其他昆虫的β-actin序列一致性可达97%～99%;实时定量PCR结果显示,该基因在中华豆芫菁不同组织、注射刺激与非刺激情况下表达量无显著差异(P〉0.05)。【结论】:中华豆芫菁β-actin基因可作为基因表达定量研究中的可靠内参。该基因的cDNA序列已递交GenBank,获得登录号为JQ764814。