不同EGFP-蜘蛛丝融合基因在昆虫细胞的表达及融合丝蛋白形成机制初探(英文)

编号 zgly0001322592

文献类型 期刊论文

文献题名 不同EGFP-蜘蛛丝融合基因在昆虫细胞的表达及融合丝蛋白形成机制初探(英文)

作者 赵爱春  夏庆友  鲁成  向仲怀  张袁松  中垣雅雄 

作者单位 西南大学生物技术学院农业部蚕桑学重点开放实验室  日本信州大学纤维学部应用生物学科蚕病生理学实验室  日本信州大学纤维学部应用生物学科蚕病生理学实验室 重庆400716  重庆400716  日本长野上田386-8567 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2007年04期

年份 2007 

分类号 Q78 

关键词 蜘蛛丝  全长管状腺丝cDNA  Bac-to-Bac/AcNPV杆状病毒表达系统  丝蛋白  形成机制 

文摘内容 蜘蛛能吐出具有优异机械特性的多种类型的丝,其中管状腺丝用于构建卵囊并具有良好的分子和机械性能,是目前唯一报道的全长cDNA序列的蜘蛛丝。基于为将来利用生物工程方法大量生产高性能的仿蜘蛛丝纤维提供基础信息,通过Bac-to-Bac/AcNPV杆状病毒表达系统,在强启动子驱动下,对2个大小不同的蜘蛛卵囊丝蛋白基因序列(全长cDNA序列和部分cDNA序列)与EGFP报告基因实现了在AcNPV昆虫细胞中的融合表达。绿色荧光和W estern印迹分析表明,被表达出的2个大小不同的卵囊丝融合蛋白在昆虫细胞胞质中呈现出明显不同的溶解性。含有部分卵囊丝基因的短EGFP-蜘蛛丝融合基因的表达产物在胞质里具有可溶性;而含有全长卵囊丝基因的巨大EGFP-蜘蛛丝融合基因的表达产物倾向于自我装配形成沉淀聚合物。研究结果也暗示了蜘蛛丝蛋白的分子大小可能对其装配成高性能的丝纤维有重要影响。