编号
zgly0001330636
文献类型
期刊论文
文献题名
番茄叶片液泡转化酶基因植物反义表达载体的构建与瞬时表达
作者单位
西北农林科技大学园艺学院
河南科技大学林学院 河南洛阳471003
陕西杨凌712100
母体文献
西北农林科技大学学报(自然科学版
年卷期
2007年04期
年份
2007
分类号
S641.2
关键词
番茄
液泡转化酶
反转录PCR
反义表达载体构建
瞬时表达
文摘内容
在分析植物液泡转化酶基因保守区序列的基础上,设计1对PCR引物,以番茄(中蔬四号)叶片总RNA的反转录产物为模板,扩增出长为668 bp的cDNA片段,并克隆入pMD-18 T simple载体。测序结果表明,所获得的片段为番茄液泡转化酶基因TIV1的片段;PCR和酶切分析表明,该片段已成功定向连入到双无载体pBinAR的CaMV 35S启动子和OCS终止子间,构建成反义植物表达载体pBinAR-aTIV1;菌落PCR表明质粒成功转化入农杆菌EHA105;瞬时表达证明该反义片段对番茄叶片液泡转化酶活性具有明显的抑制效果。