中国山葡萄‘双红’胺氧化酶(amine oxidase)基因的抗霜霉病研究

编号 zgly0001523604

文献类型 期刊论文

文献题名 中国山葡萄‘双红’胺氧化酶(amine oxidase)基因的抗霜霉病研究

作者 李欣龙  赵未央  张雅丽  卢江 

作者单位 中国农业大学食品科学与营养工程学院 

母体文献 果树学报 

年卷期 2016年05期

年份 2016 

分类号 S436.631 

关键词 山葡萄‘双红’  胺氧化酶  RT-qPCR  瞬时表达  亚细胞定位 

文摘内容 【目的】探究高抗霜霉病的中国山葡萄‘双红’中胺氧化酶（VaAO）在抗葡萄霜霉病中的作用。【方法】以中国山葡萄‘双红’为试材,采用RT-PCR技术,克隆山葡萄‘双红’的AO基因,命名为VaAO;利用RT-qPCR在转录水平上分别检测了抗病的山葡萄‘双红’和感病的欧亚种葡萄‘赤霞珠’接种霜霉菌后AO的表达模式;通过农杆菌介导的瞬时转化法,使VaAO分别在本氏烟草和葡萄‘赤霞珠’中瞬时过表达;利用DAB染色法,检测H2O2的积累。【结果】VaAO基因的开放阅读框（ORF）长2 184 bp,编码727个氨基酸。经BLAST比对发现VaAO氨基酸序列与欧亚种葡萄‘黑比诺’的氨基酸序列同源性高达99%。定量结果表明:抗病的‘双红’和感病的‘赤霞珠’的AO基因均受到霜霉菌诱导,且相对表达量都在接种72 h后达到最高峰。值得注意的是,VaAO在接种后24 h表现出显著上调。VaAO在烟草中瞬时表达后发现其蛋白定位在细胞核和细胞膜中。VaAO在‘赤霞珠’叶片中瞬时过表达能够显著提高叶片中H2O2的积累和抵抗霜霉病的能力。【结论】成功克隆了山葡萄‘双红’的VaAO基因,定量分析和瞬时表达均表明VaAO基因在参与葡萄抗霜霉病的过程中发挥了重要作用。