胆囊癌肝转移模型的建立和高转移细胞亚群的筛选

编号 zgly0000408559

文献类型 期刊论文

文献题名 胆囊癌肝转移模型的建立和高转移细胞亚群的筛选

作者 刘颖斌  何小伟  王建伟  李江涛  李克强  刘付宝  薛建锋  朱锦辉  李兵  彭淑牖 

作者单位 浙江大学医学院附属第二医院外科  浙江嘉兴市第一人民医院  浙江省宁波市第二人民医院肿瘤外科 

母体文献 中华医学杂志 

年卷期 2006,86(30)

页码 2117-2121

年份 2006 

分类号 R735.8 

关键词 胆囊肿瘤  肿瘤转移  动物  实验 

文摘内容 目的建立胆囊癌肝转移模型并通过模型筛选高转移亚群细胞, 为胆囊癌肝转移研究提供良好的实验工具。方法胆囊癌GBC—SD细胞在含10%胎牛血清的RPMI1645体外培养、胰蛋白酶分离、生理盐水制备细胞悬液1×10^7/ml, 4—6周龄裸小鼠脾脏接种建立胆囊癌转移模型; 从实验动物肝转移灶中分离肿瘤细胞, 经过原代、传代培养, 同样的方法建立转移模型, 进行第二轮和第三轮高转移表型胆囊癌细胞亚群的筛选。光镜下观察转移灶和筛选细胞的形态特征; 抽提细胞与实验动物肝组织DNA, PCR扩增三对人类特异的微卫星序列。结果建立了裸小鼠胆囊癌肝脏转移模型, 转移灶分布肝实质各处, 但以边缘为主。左叶多受侵犯, 部分全肝转移。组织学观察转移病灶为腺癌。第一轮、第二轮、第三轮出转移模型在接种后10周、7周、5周形成肉眼转移灶, 转移率为60%、70%、90%。从第三轮转移灶中筛选出高转移胆囊癌细胞亚群, 命名为GBC—SD/M3。与亲代细胞GBC—SD相比, 所筛选的GBC—SD/M3具有相似的形态特征。GBC—SD、GBC—SD/M3在微卫星D14S68、D18S69、D20S199位点扩增产物片段完全相同, 荷瘤裸鼠肝脏没有扩增出相应的产物片段。结论本实验成功建立了胆囊癌肝转移模型; 从转移模型中筛选出高转移胆囊癌细胞亚群GBC—SD/M3, 与亲代细胞GBC—SD相比, 形态和遗传背景保留一致性, 但具有更高转移能力。