肉牛早孕因子(EPF)的活性检测及分离纯化

编号 zgly0001394570

文献类型 期刊论文

文献题名 肉牛早孕因子(EPF)的活性检测及分离纯化

作者 贺加双  马卫明  邓立新  宋移福  刘莲莲  曹永芝  谢冰 

作者单位 山东农业大学动物科技学院  河南农业大学牧医工程学院 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2011年06期

年份 2011 

分类号 S823 

关键词 肉牛  早孕因子  妊娠状态  孕血清 

文摘内容 【目的】检测怀孕肉牛早孕因子(Early pregnancy factor,EPF)的活性,并对其进行分离纯化,以期为EPF快速检测方法的建立提供依据。【方法】采集妊娠1~9个月的肉牛血样,并进行妊娠诊断,通过玫瑰花环抑制试验(Rosette inhibition test,RIT)检测其早孕因子的活性。对有活性的血样依次进行DEAE-52离子交换层析、ConASepharose 4B亲和层析和Heparin Sepharose Cl 6B亲和层析,分离纯化EPF,对纯化产物进行SDS-PAGE检测,并测定其等电点。【结果】怀孕牛和未怀孕牛血清的玫瑰花环抑制滴度差异显著(P<0.05)。玫瑰花环抑制试验显示,纯化出的EPF具有活性,其分子质量为53.6 ku,等电点为6.8。【结论】利用玫瑰花环抑制试验检测早孕因子活性,可以鉴定肉牛的妊娠状态;利用层析的方法可以分离出早孕因子的活性蛋白。