结核分支杆菌MPT83在真核、原核表达载体中的克隆、表达与鉴定

编号 zgly0001266727

文献类型 期刊论文

文献题名 结核分支杆菌MPT83在真核、原核表达载体中的克隆、表达与鉴定

作者 田霞  呼西旦  潘怡  朱玉贤  蔡宏 

作者单位 北京大学生命科学院  新疆畜牧科学院  北京大学生命科学院 北京100871  新疆乌鲁木齐830000  北京100871  北京100871 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2003年04期

年份 2003 

分类号 R346 

关键词 结核分支杆菌  免疫原性蛋白MPT83  SDS-PAGE  胶  Western blotting 

文摘内容 为了克隆、鉴定和表达结核分支杆菌抗原蛋白 MPT83 ,为结核病的诊断以及亚单位疫苗、核酸疫苗的制备和应用奠定基础。以结核分支杆菌标准菌株 H3 7RV基因组 DNA为模板 ,PCR扩增目的基因 mpt83 ,扩增产物酶切后分别克隆到真核、原核表达载体 p JW43 0 3和p ET2 2 b( +)中 ,构成重组真、原核表达载体 83eu和 MPT83。经酶切和序列鉴定为正确的重组真核表达载体 83 eu和重组原核表达载体MPT83 ,分别转染 COS7细胞和转化 BL2 1( DE3 ) plys S。结果表明 ,经 SDS-PAGE、Westernblotting检测显示 ,IPTG诱导的原核表达载体MPT83在 2 .6万处有正确而特异的蛋白条带 ;转染 COS7细胞的真核表达载体 83 eu,Westernblotting检测表明也有与结核分支杆菌抗血清特异反应的蛋白条带