集胞藻类金属硫蛋白的纯化、性质和溶液构象的研究

编号 zgly0001210790

文献类型 期刊论文

文献题名 集胞藻类金属硫蛋白的纯化、性质和溶液构象的研究

作者 陈正佳  李晓凡  施定基  李玲媛  茹炳根 

作者单位 北京大学生命科学学院蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室!北京  10087  中国科学院植物研究所!北京  100096  北京大学 

母体文献 植物学报 

年卷期 1999年02期

年份 1999 

分类号 Q946.1 

关键词 集胞藻  类金属硫蛋白  分离和纯化  性质  溶液构象 

文摘内容 集胞藻Synechocysitissp.PCC6803光照培养，加入100μmol/LZnCl2诱导藻内类金属硫蛋白（MT-like）的表达。离心收集鲜藻，超声波破碎细胞，离心除沉淀。上清液72℃加热3min去杂蛋白，离心，上清液依次经过分子筛层析柱，阴离子交换柱和脱盐柱，可得蓝藻类金属硫蛋白。5L培养液收集鲜藻7.6g，一次上样1．52g鲜藻的裂解物，冻干后得15mg纯化的蛋白样，为鲜藻重的0．1％．经分析其等电点为pH4．5，分子量为6．986kD，由58个氨基酸残基组成。其序列中含有较多疏水氨基酸残基（36％），但其半胱氨酸含量仅为5％。CD（圆二色性）图谱表明其二级结构主要为无规卷曲，不含α－helix和β-sheet，无哺乳动物的金属硫蛋白所具有的典型双结构域结构。紫外吸收光谱表明Zn结合的类金属硫蛋白在220nm也有较高的吸收值。红外光谱分析的结果表明，此类金属硫蛋白的吸收光谱与高等动物的金属硫蛋白的吸收光谱类似。