甘蓝BoMLPKn1的克隆及其拟南芥同源基因AtAPK1b的功能研究

编号 zgly0001689388

文献类型 期刊论文

文献题名 甘蓝BoMLPKn1的克隆及其拟南芥同源基因AtAPK1b的功能研究

作者 施松梅  高启国  左同鸿  蒲全明  刘豫东  刘贵喜  朱利泉  何新华 

作者单位 西南大学园艺园林学院  西南大学资源环境学院  西南大学农学与生物科技学院  南充市农业科学院 

母体文献 园艺学报 

年卷期 2019年11期

年份 2019 

分类号 S635  Q943.2 

关键词 甘蓝  M–位点受体激酶  基因克隆  表达分析  亚细胞定位  基因编辑 

文摘内容 在克隆甘蓝BoMLPK编码序列过程中,获得BoMLPKf1/2编码序列和1个新的转录文本(命名为BoMLPKn1)。BoMLPKf1/2和BoMLPKn1的c DNA大小分别为1 215、1 233和1 257 bp,分别编码含404、410和418个氨基酸残基的多肽链。与BoMLPKf1/2相比,BoMLPKn1有两个插入序列,一个是在1 102～1 114 bp之间有12个碱基的插入,另一个是在1 152～1 182 bp之间有30个碱基的插入。BoMLPKf1/2定位在甘蓝3号染色体上,BoMLPKn1定位在4号染色体上。氨基酸序列比对发现,BoMLPKf1和BoMLPKn1的N端均含典型的豆蔻酰化基序,BoMLPKf2的N端含疏水结构域。3个转录文本均具有1个高度保守的Ser/Thr蛋白激酶结构域。RT-PCR检测发现自交不亲和甘蓝自花授粉15min后BoMLPKf2相对表达量急剧升高,BoMLPKf1和BoMLPKn1在自花授粉15 min后相对表达量无明显变化。亚细胞定位检测到BoMLPKn1定位在细胞膜上。利用CRISPR-Cas9植物编辑系统对BoMLPKn1拟南芥直系同源基因AtAPK1b基因组进行定点敲除,获得突变体植株。与野生型相比,突变体植株均能够正常开花结籽。结果表明MLPKn1基因在整个十字花科进化中是高度保守的,不参与自交不亲和反应,这与MLPKf1/2不同。