沈抚灌区广宿主石油烃代谢质粒的分离及鉴定

编号 zgly0000824848

文献类型 期刊论文

文献题名 沈抚灌区广宿主石油烃代谢质粒的分离及鉴定

作者 王亚菲  李慧  李小彬 

作者单位 中国科学院沈阳应用生态研究所森林与土壤生态国家重点实验室 

母体文献 应用生态学报 

年卷期 2013(11)

页码 3289-3299

年份 2013 

分类号 Q938.1 

关键词 水平基因转移  三亲配对外源质粒分离  广宿主质粒  石油烃降解  生物修复 

文摘内容 本研究采用“三亲配对外源分离法”, 从沈抚灌区土壤、底泥和水样中共计分离得到8个广宿主(BHR)石油烃代谢质粒, 并通过对其进行抗生素抗性检测和抗性遗传标记, 将其转移至大肠杆菌(Escherichiacoli)EC100宿主中进行操作.不相容性群分析结果表明: pS3.2C、pS4-6G为IncP质粒; pS3-2G、pW22.3G、pA15-7G为IncN质粒; pS7.2G为IncW质粒; pA23-1G和pA10-1C为IncQ质粒.采用PCR扩增已报道的石油烃污染物降解基因的方法初步分析其石油烃代谢功能, 质粒pS3-2G、pS7-2G、pA23—1G、pW22-3G和pA10—1C上含有编码芳香环羟化双加氧酶基因(phdA)和甲苯单加氧酶基因(touA)的片段; pA15-7G含有编码甲苯双加氧酶和甲苯单加氧酶基因片段; pS3-2C含有编码芳香环羟化双加氧酶、苯双加氧酶和甲苯双加氧酶基因片段; pS4-6G仅含有编码芳香环羟化双加氧酶基因片段.通过宿主范围检测, 除质粒pS3-2C外, 其余7个质粒均可在变形菌纲(Proteobacteria)α-、β-、γ-亚纲的代表性菌株根瘤农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)C58、钩虫贪铜菌(Cupriavidusnecator)JMP228、大肠杆菌EC100间进行转移并稳定传代.