沙吸附DNA的分布及转化活性

编号 zgly0000391050

文献类型 期刊论文

文献题名 沙吸附DNA的分布及转化活性

作者 欧剑虹  倪丽娜  叶学成  黄永胜  谢志雄  陈向东  沈萍 

作者单位 武汉大学生命科学学院 

母体文献 生态学报 

年卷期 2005,25(8)

页码 2019-2024

年份 2005 

分类号 Q933 

关键词 沙  DNA  转化  水平基因转移 

文摘内容 尽管自然环境中存在着大量的DNase, 大分子体外DNA在土等生态环境中存在并保持转化活性。实验表明DNA被沙土吸附之后会被沙土保护而产生对DNase的抗性。然而对沙中DNA的检测多是通过PCR或者探针杂交的方法来进行, 采用转化方法进行来检测的却鲜有报道。为了研究DNA释放进沙之后的分布及转化活性, 建立了流过式微型离心沙柱。将20μL pUC18置于1.0g直径介于1.2～2.5mm之间的沙中, 1.5mL 0.1mol/L CaCl2洗脱之后再用200μL TEN缓冲液提取。结果表明吸附于沙中的DNA经提取后仍然具有生物转化活性, 并且与洗脱液、提取液具有不同的转化活性和对DNase I抗性, 说明DNA与沙粒的结合不只是一种简单的附着, 而是3种复杂的复合体结构。相对于没有沙保护而只能在室温下保留7d转化活性的DNA, 在被沙吸附保护之后的DNA可以保存转化活性达35d以上。研究结果还表明在存在感受态细胞的情况下, 生物释放出来的DNA并非直接与沙粒结合, 而是优先与感受态细胞结合。推测认为沙吸附DNA的转化活性同DNA的构象及同感受态细胞接触的机会相关, 而与DNA的浓度不直接相关。这些结果为研究环境中存在的DNA库及其与混居的微生物问的相互作用, 水平基因转移及其生态效应提供了有价值的信息。