兰属SRAP-PCR反应体系的建立与优化

编号 zgly0001419985

文献类型 期刊论文

文献题名 兰属SRAP-PCR反应体系的建立与优化

作者 李达  张宏志  龙岳林  蒋露  陈己任  黄笛  吕长平 

作者单位 湖南农业大学园艺园林学院  深圳市野生动植物保护管理处 

母体文献 亚热带植物科学 

年卷期 2012年03期

年份 2012 

分类号 S682.31 

关键词 兰属  DNA模板  SRAP-PCR反应体系  优化 

文摘内容 为获得兰属清晰的SRAP标记图谱,对兰属SRAP-PCR反应体系进行了初步探讨,建立了扩增多态性高、重复性好、带型清晰的SRAP-PCR反应体系。最佳反应体系:在30μL反应总体系中,Mg2+2.2 mmol/L、dNTPs 0.8 mmol/L、DNA模板150 ng、DNA聚合酶2.0 U,上、下游引物各1.5μmol/L;扩增程序:在94℃预变性4 min,反应前5个循环在94℃变性1 min、35℃复性1 min、72℃延伸1 min的条件下运行,随后的30个循环复性温度提高至55℃,最后72℃延伸5 min.