米曲霉碱性蛋白酶基因的前导区对其在毕赤酵母中表达的必要性

编号 zgly0000598864

文献类型 期刊论文

文献题名 米曲霉碱性蛋白酶基因的前导区对其在毕赤酵母中表达的必要性

作者 郭继平  马光  马莺 

作者单位 哈尔滨工业大学食品科学与工程学院  东北林业大学生命科学学院 

母体文献 上海交通大学学报：农业科学版 

年卷期 2008,26(3)

页码 237-241

年份 2008 

分类号 Q786 

关键词 米曲霉碱性蛋白酶基因  前导区  毕赤酵母  异源表达 

文摘内容 为探讨前导区对米曲霉碱性蛋白酶基因在毕赤酵母中表达的必要性，本试验首先将米曲霉碱性蛋白酶的成熟肽编码基因(alp-m)和表达载体pPIC9K双酶切后连接，得到重组表达载体pPIC9K／a／p-m。然后将其线性化后电转化毕赤酵母GS115，筛选阳性转化子进行甲醇诱导表达，并进行SDS-PAGE分析和碱性蛋白酶活力测定，同时在转录水平上对目的基因进行了Northem blot检测。将得到的结果与以前研究中得到的带有前导区的米曲霉碱性蛋白酶成熟肽基因在毕赤酵母中的表达结果进行对比。结果表明：如果没有前导区，米曲霉碱性蛋白酶成熟肽基因在毕赤酵母中表达，无论在胞内和胞外均检测不到目的蛋白。由此可见，米曲霉碱性蛋白酶基因在毕赤酵母中表达时必须有前导区的参与。