麻疯树SRAP—PCR反应体系的优化

编号 zgly0000679883

文献类型 期刊论文

文献题名 麻疯树SRAP—PCR反应体系的优化

作者 仲丛来  丁贵杰  沈凌 

作者单位 贵州大学造林生态研究所 

母体文献 贵州农业科学 

年卷期 2010(4)

页码 19-22

年份 2010 

分类号 S727.4 

关键词 麻疯树  SRAP  正交设计  优化 

文摘内容 采用L9(4^5)正交设计对影响麻疯树SRAP反应的5个因子(DNA模板浓度、Mg^2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、Taq酶)在4个水平上进行优化试验, PCR结果采用SPSS13.0进行分析。结果表明, 各因素对SRAP反应的影响依次为: Mg^2+〉dNTPs〉引物〉Taq酶〉DNA模板。对SRAP反应结果影响较大的3个因子(Mg^2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度)进行单因素试验, 确立麻疯树sRAP反应最佳体系为: 20μL的PCR体系中含有Mg^2+2.5mmol/L、引物0.4μmol/L、dNTPsl50gmol/L、DNA模板60ng、Taq酶0.5U。将该体系用于麻疯树的SRAP扩增能获得稳定、清晰的多态性条带。