编号 zgly0000613630
文献类型 期刊论文
文献题名 利用正交设计优化一品红SRAP反应体系
学科分类 220.5010;园林植物学
作者单位 扬州大学园艺与植物保护学院 江苏省农业科学院园艺研究所
母体文献 苏州科技学院学报:自然科学版
年卷期 2009,26(1)
页码 48-52
年份 2009
分类号 S685.23
关键词 一品红 SRAP 正交设计 优化
文摘内容 运用L16(4^5)正交设计对影响一品红SRAP反应的5个因素(DNA模板浓度、M矿’浓度、dNTPs浓度、引物浓度、Taq酶)在4个水平上进行优化试验,PCR结果采用DPSV3.01软件分析。结果表明,各因素对SRAP反应的影响依次为:Mg2+〉引物〉dNTPs〉DNA模板〉Taq酶;一品红SRAP反应最佳体系为:50μL的PCR体系中含有Mg2+ 2.5mmol·L-1.引物500pmol·L-IdNTPs 0.20mmol·L-1.DNA模板100ng、Taq酶1.0U;应用最佳反应体系对PCR程序中的退火温度进行优化,得出SRAP—PCR反应适宜的第一步退火温度为36℃,第二步退火温度为50℃。