国槐遗传转化体系的优化

编号 zgly0000629452

文献类型 期刊论文

文献题名 国槐遗传转化体系的优化

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 张晓英  甘敬  尹伟伦  朱祯  王华芳 

作者单位 北京林业大学生物科学与技术学院  北京市琅山苗圃  北京市园林绿化局  中国科学院遗传与发育生物学研究所 

母体文献 林业科学 

年卷期 2009,45(5)

页码 20-26,F0003

年份 2009 

分类号 S718.46  Q943.2 

关键词 国槐  根癌土壤农杆菌  乙酰丁香酮  遗传转化  槐尺蠖  抗虫基因 

文摘内容 采用根癌农杆菌介导的国槐叶盘转化法,在建立修饰的豇豆胰蛋白酶抑制剂基因（sck）转化体系过程中,对影响农杆菌转化频率的各种因素进行研究。结果表明：国槐叶片需在黑暗条件下在MS培养基上预培养5天,农杆菌菌株选用GV3101,农杆菌共培养3天较合适;农杆菌菌液浓度OD600约为0.7,感染时间10min;侵染前的菌液和共培养基中添加200μmol·L^-1乙酰丁香酮（AS）对国槐遗传转化有明显的促进作用;抑制农杆菌生长的抗生素浓度以头孢霉素（Cef）500mg·L^-1最好。PCR和Southern blotting检测证实sck基因已整合到国槐基因组中。