卷柏总蛋白质提取方法及双向电泳条件的建立

编号 zgly0000474966

文献类型 期刊论文

文献题名 卷柏总蛋白质提取方法及双向电泳条件的建立

作者 魏琳  陈由强  叶冰莹  黄骐  陈如凯 

作者单位 福建师范大学生物工程学院  福州市农业科学研究所  福建农林大学农业部甘蔗生理生态与遗传改良重点开放实验室 

母体文献 生物技术通讯 

年卷期 2006,17(1)

页码 46-48

年份 2006 

分类号 Q503  Q949.362.3 

关键词 复苏植物  卷柏  蛋白质组  双向电泳 

文摘内容 目的: 建立复苏植物——卷柏总蛋白质的提取方法, 以及可以对其蛋白质组进行阵列分离的双向电泳条件。方法: 通过多种条件的组合与优化, 建立了以物理和化学2种方法充分裂解植物组织细胞, 并采用低温操作、加入PVP等去除植物组织中大量的酚类物质, 最后离心去除不溶性杂质的卷柏蛋白质组双向电泳(2-DE)样品制备方法。第1向电泳为固相pH梯度等电聚焦, 第2向电泳为垂直平板SDS—PAGE。结果: 通过对样品制备、蛋白定量、第1向和第2向电泳、染色方法等各实验环节进行控制和优化, 凝胶经考马斯亮蓝染色后, 可分辨蛋白质斑点数约600个。结论: 建立了卷柏总蛋白质的提取方法及蛋白质组双向电泳技术, 为后续研究卷柏在干旱胁迫下的差异表达奠定了基础。