一种适用于质谱分析的简化胶内酶解方法

编号 zgly0000518110

文献类型 期刊论文

文献题名 一种适用于质谱分析的简化胶内酶解方法

学科分类 220.1050;树木生理学

作者 王旭初  范鹏祥  李银心 

作者单位 中国科学院植物研究所光合作用与环境分子生理学重点实验室  中国科学院研究生院 

母体文献 植物生理与分子生物学学报 

年卷期 2007,33(5)

页码 449-455

年份 2007 

分类号 Q945 

关键词 蛋白质组  胶内酶解方法  双向电泳  肽质量指纹图谱  质谱分析 

文摘内容 在常规方法的基础上，设计了一种适于质谱分析的简化胶内酶解方法。改进的步骤包括：(1)通过加大洗涤所用超纯水量、延长涡混时间来强化凝胶洗涤的环节；(2)加入酸化处理来提高胰蛋白酶的活性；(3)在预酶解时不加CaCl2，减少了酶的自切作用；(4)省略了蛋白质样品脱盐、脱SDS的步骤；(5)直接吸取酶解液进行质谱分析。系统比较该简化酶解法和最新报道的一种酶解方法的质谱鉴定效果，简化法能有效减少酶解后肽段的损失，增加质谱数据库搜索的信息量，得到更可靠的蛋白质鉴定结果。