抗O型口蹄疫病毒单克隆抗体的制备及其生物*学特性鉴定

编号 zgly0001347521

文献类型 期刊论文

文献题名 抗O型口蹄疫病毒单克隆抗体的制备及其生物*学特性鉴定

作者 赵磊  魏建忠  周国辉  于永忠  李万  于力 

作者单位 安徽农业大学动物科技学院  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室大动物病研究室 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2008年11期

年份 2008 

分类号 S852.5 

关键词 O型口蹄疫病毒  单克隆抗体  生物学特性鉴定 

文摘内容 【目的】针对O型口蹄疫病毒(Foot-and-mouth Disease Virus,FMDV)制备特异性的单克隆抗体,为进一步研制O型口蹄疫诊断方法提供物质基础。【方法】用纯化的O型口蹄疫病毒免疫Balb/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,结合间接ELISA和间接免疫荧光(IFA)筛选,有限稀释法克隆,建立稳定的阳性杂交瘤细胞株,并对制备的单克隆抗体进行生物学特性鉴定。【结果】获得了2株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为2B9和5F7,抗体亚类鉴定其均为IgG1/κ类型;IFA结果显示,2株单克隆抗体仅与O型FMDV反应,不与Asia1型FMDV反应,推测其均为抗O型FMDV的型特异性单克隆抗体;Western blot结果显示,2株单克隆抗体均无特异性条带出现,表明其所针对的抗原表位均为构象型表位;相加ELISA试验表明,2B9与5F7两株单克隆抗体识别的抗原表位相近或相同;经硫氰酸盐洗脱法测定,2B9和5F7的相对亲和力指数均为1.5 mol/L;中和试验显示,2株单克隆抗体都不具有中和活性。【结论】2株单克隆抗体的获得及其生物学性质的鉴定,为O型口蹄疫诊断方法的建立提供了基础材料。