猴免疫缺陷病毒实时荧光环介导等温扩增快速检测方法的建立

编号 zgly0001562180

文献类型 期刊论文

文献题名 猴免疫缺陷病毒实时荧光环介导等温扩增快速检测方法的建立

作者 刘助红  王静  黄碧洪  尹雪琴  张钰  郭鹏举  黄韧 

作者单位 广东省实验动物监测所广东省实验动物重点实验室 

母体文献 中国动物传染病学报 

年卷期 2017年05期

年份 2017 

分类号 S852.65 

关键词 猴免疫缺陷病毒  实时荧光环介导等温扩增技术  检测 

文摘内容 以猴免疫缺陷病毒(Simian immunodeficiency virus,SIV)的核心蛋白Gag区域的部分保守基因序列为检测靶标,通过软件设计内、外引物和环引物,借助恒温荧光扩增仪建立SIV实时荧光环介导等温扩增快速检测方法(real-time loop-mediated isothermal amplification,Realamp),根据有无S型扩增曲线判断检测结果。Realamp方法对含有猴免疫缺陷病毒目标片段的质粒标准品的检测灵敏度为300 copies/μL,对猴类的其他常见病原如猴D型逆转录病毒、猴T淋巴细胞趋向性病毒、猴B病毒等无非特异性扩增。通过33份临床样本的检测,Realamp检出的阳性2例,qPCR检出的阳性率为1例,两种检测方法的符合率为97%。本研究建立的Realamp检测技术所需设备简单、反应效率快、检测灵敏度高和特异性强,可用于偏远地区猴养殖单位相关病原的检测。