PD0325901和CHIR99021促进牛体细胞克隆胚胎体外发育的研究

编号 zgly0001481128

文献类型 期刊论文

文献题名 PD0325901和CHIR99021促进牛体细胞克隆胚胎体外发育的研究

作者 吴新颖  桑元坤  王勇胜  张涌  华松 

作者单位 西北农林科技大学动物医学院  南开大学医学院  农业部动物生物技术重点实验室 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2015年09期

年份 2015 

分类号 S823  Q813 

关键词 小分子信号通路抑制剂  体细胞克隆  胚胎发育  牛 

文摘内容 【目的】选取MAP2K和GSK3的抑制剂PD0325901、CHIR99021(简称2i)对牛体细胞核移植(SCNT)胚胎进行处理,研究这2种小分子物质对胚胎发育及其多能性基因(OCT4、SOX2、KLF4、DPPA3、CDX2、GATA4、NANOG)表达的影响。【方法】以牛皮肤成纤维细胞为供体,牛MⅡ期卵母细胞为受体,构建牛SCNT胚胎,采用添加2i(PD0325901 0.4μmol/L,CHIR99021 3μmol/L)的胚胎培养液体外培养SCNT胚胎72h,以mSOF+DMSO培养液处理的SCNT胚胎及体外受精(IVF)胚胎为对照,统计核移植胚胎体外发育率,并对胚胎多能性相关基因的表达进行实时定量PCR检测。【结果】与对照相比,2i处理能使SCNT胚胎囊胚率和囊胚细胞总数显著增加,凋亡细胞率显著下降,多能性相关基因NANOG和SOX2表达量上调,而细胞分化相关基因GATA4的表达量下调,其他基因表达量变化不显著,从而使SCNT胚胎的发育状态更接近于IVF胚胎。【结论】2i共处理72h可优化SCNT胚胎发育状态。