桔小实蝇P450基因CYP6A41的克隆与表达分析

编号 zgly0000807235

文献类型 期刊论文

文献题名 桔小实蝇P450基因CYP6A41的克隆与表达分析

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 胡黎明  申建梅  胡美英  宾淑英  廖泓之  林进添 

作者单位 仲恺农业工程学院农学院  华南农业大学资源环境学院农药与化学生物学教育部重点实验室 

母体文献 西北农林科技大学学报: 自然科学版 

年卷期 2012(8)

页码 113-121

年份 2012 

分类号 Q785 Q786 

关键词 桔小实蝇  P450  基因克隆  实时荧光定量PCR  蛋白同源建模  分子对接 

文摘内容 【目的】:克隆桔小实蝇Bactrocera dorsalis(Hendel)P450基因,研究其在不同组织及发育时期的表达情况,探索其可能存在的生理功能。【方法】:采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和快速扩增cDNA末端(RACE)技术,克隆桔小实蝇P450基因CYP6A41;采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)方法,研究CYP6A41mRNA在桔小实蝇不同组织及不同发育时期的相对表达量。采用Homology程序模拟构建CYP6A41蛋白的三维结构,应用CDOCK程序将之与甲酸乙酯、乙酸乙酯、甲基丁香酚3种气味分子进行模拟对接分析。【结果】:克隆获得了桔小实蝇P450基因,并命名为CYP6A41。CYP6A41阅读框全长1 530bp,编码509个氨基酸,该蛋白序列与桔小实蝇的另外一种P450蛋白CYP4 D46序列的一致性最高,达99.2%。荧光定量PCR分析表明,CYP6A41在桔小实蝇不同发育时期都有表达,并且在化蛹第1天表达量达到最高峰;CYP6A41在各组织中也都有表达,但以触角中的表达量最高;雄虫生殖节中的表达量约是雌虫的6.8倍;对接结果表明,CYP6A41蛋白与3种小分子化合物均能形成稳定的复合物。【结论】:CYP6A41在桔小实蝇雌雄生殖节中的差异表达,暗示该蛋白在雄虫生殖生理过程中发挥作用;CYP6A41在化蛹第1天及触角中的高表达量暗示CYP6A41不仅参与了蛹早期的发育过程,且可能参与了嗅觉气味分子的降解过程。