编号 zgly0000246300
文献类型 期刊论文
文献题名 渗透胁迫下脱水蛋白DHN1在猕猴桃细胞中表达及亚细胞分布的动态变化
作者单位 北京师范大学生命科学学院
母体文献 中国科学: C辑
年卷期 2001,31(6)
页码 505-512,T001
年份 2001
分类号 S663.4 Q786
关键词 猕猴桃 悬浮细胞 渗透胁迫 脱水蛋白DHN1 绿色荧光蛋白 亚细胞分布 基因表达 逆境生理
文摘内容 以绿色荧光蛋白(GFP)为报告分子, 通过构建DHN1-mGFP4融合蛋白表达载体, 研究了渗透胁迫条件下脱水蛋白DHN1的表达及其亚细胞分布的动态变化, 采用PCR方法在脱水蛋白基因dhn1两端引入XbaI和BamHI限制性内切酶位点, 克隆到质粒pBIN-35SmGFP4, 构建DHN1-mGFP4融合蛋白表达载体, 并采用基因转化猕猴桃(A.delicisoa)悬浮细胞, 培养10h后观察到高效表达的GFP绿色荧光, 绿色荧光只出现在细胞核内, 提高培养介质渗透势后, 可以诱导脱水蛋白向细胞质分布(主要集中在质膜周围), 并且增加介质渗透势可以明显缩短细胞质出现绿色荧光的时间, 蛋白合成抑制剂环已亚胺能够抑制细胞质绿色荧光的出现, 暗示细胞质出现的脱水蛋白是诱导产生的结果。ABA可以明显促进细胞质绿色荧光的出现, 并且随着介质渗透势的升高迅速缩短细胞质绿色荧光的出现时间。