梅花类黄酮3＇-羟化酶基因片段基于基因组DNA的简并PCR法克隆

编号 zgly0000474292

文献类型 期刊论文

文献题名 梅花类黄酮3＇-羟化酶基因片段基于基因组DNA的简并PCR法克隆

作者 赵昶灵  杨清  陈俊愉 

作者单位 南京农业大学生命科学学院  云南农业大学农学与生物技术学院  北京林业大学园林学院 

母体文献 广西植物 

年卷期 2006,26(6)

页码 608-616

年份 2006 

分类号 Q949.7 

关键词 梅花  基因组DNA提取  类黄酮3＇-羟化酶基因片段  简并PCR 

文摘内容 用该研究设计的“预先去杂-SDS法”从梅花嫩叶提取到高质量的基因组DNA。根据11条已公开发表的并提交到GenBank的类黄酮3＇-羟化酶基因cDNA的假定氨基酸序列的保守区设计2个正向简并引物和3个反向简并引物组成6对引物, 仅有1对引物能以PCR法同时从梅花‘南京红须’、‘南京红’和‘粉皮宫粉’的基因组DNA扩增到一个469bp的核苷酸片段, 这3个片段在总体上有99.72%的一致性, 与11条类黄酮3＇-羟化酶基因cDNA的相应区域有65.57%的一致性。同时, “GGEK”并非类黄酮3＇-羟化酶的特征性模体。这是首次从木本植物的基因组DNA克隆到类黄酮3＇-羟化酶基因片段。该研究结果可为梅花类黄酮3＇-羟化酶基因全长的克隆奠定基础。